程颖：循环细胞在小细胞肝癌临床研究中的进展

反转蛋白质( Circulating tumor cells，CTCs)作为一种可替代原发的“液态恶开放性肿瘤新种”，已在分散开放性乳白血病、癌和结直肠癌中都用作病状称赞。小蛋白质膀胱癌(Small celllung cancer，SCLC)许多组织新种比如说不足，且不足合理的追踪发作分散和得出结论病状的脊椎动物；也。仅有年来分析者CTCs在SCLC中都的诊疗领域进唯时了追寻开放性分析，发掘出CTCs对SCLC的病人、应于，追踪发作、分散，风险评估、病状以及建立个体肌肉针头法律条文方案等具有极其重要本质，本文就CTCs在SCLC诊疗领域中都的分析的发展予以综述。

一、SCLC患儿CTCs的检验方法律条文有

CTCs的检验方法律条文有主要有流式蛋白质检验应用( fluocytometry，FCM)、逆转录一聚合酶链质子化(reverse-transcriptionPCR，RT-PCR)、CellSearch系统对、CTC芯片(CTC-chip)应用和增生滤过分离蛋白质应用(isolation by size of epithelial tumor cells．ISET)等，其中都CellSearch系统对因其半自动化的操作网络服务，高的酪氨酸、敏感开放性和可重复开放性，被选为最常会领域的CTCs检验方法律条文有。

年前在2004年，Allard等首度领域CelISearch法律条文检验了99唯膀胱癌（未列举SCLC唯数）患儿的CTCs，随后Nagrath等采唯CTC-chip法律条文检验了55唯膀胱癌患儿外周噬C TCs。2009年便的分析多采唯CeIISearch法律条文检验SCI．C患儿外周噬CTCs，然而该方法律条文有由于对不足上皮蛋白质特质的蛋白质会显现出漏检确实，且与免疫磁珠及抗体混合的CTCs很难律条文唯某些后续的检验，诊疗领域受到单单。

仅有年来，随着基体科技产业的蓬勃发展，类似物CTCs表面；也的酪氨酸识别分f修饰的基体材料混合纤流控应用的CTCs检验网络服务的分析受到广泛应用关切，2013年，《自然》（Nature）杂志将CTCs基体检验选为最具创新开放性和转化发展前景的病人技术手段律条文有，成就难以置信瞩目。但就迄今来看，这两项的CTCs检验方法律条文有各有利弊，没有分析证明哪种方法律条文有对SCLC的CTCs检验越来越有优势。着眼将会，适时开发酪氨酸、敏感开放性越来越高的CTCs检验应用，为SCLC的典范和外科分析造就跃升。

二、CTCs在SCLC诊疗领域中都的分析现状

（一）CTCs计算与SCLC的病人、应于

仅有年来多项分析显示CTCs计算技术水平与SCLC的病人、应于有保持良好关系0 2009年Tanaka等领域CeIISearch法律条文检验了1 50唯7.5ml外周噬CTCs，其中都膀胱癌1 25唯、非恶开放性25唯，膀胱癌患儿还包括116唯非小蛋白质膀胱癌(non-small cell lung cancer，NSCLC)和9唯SCLC。

分析得出SCLC患儿CTCs阳开放性率为66.70-/0（6唯／9唯），突出很低NSCLC患儿的CTCs阳开放性率(白血病25.9%，鳞癌40.9%；白血病对比SCLC，P

月底，Hou等领域CeIISearch法律条文检验了50唯初治的SCLC患儿外周噬CTCs，还包括20唯单单期SCLC (limited disease，LD-SCLC)患儿和30唯广泛应用期SCLC(extensive disease，ED-SCLC)患儿，弧期ED-SCLC及LD-SCLC患儿的中都位CTCs计算共五237和2个/7.5ml噬，7唯未检出CTCs的患儿原则上为LD-SCLC，显然CTCs计算技术水平与SCLC应于系统对开放性。

类似于的结论在2012年被日本帝国学者Naito等证明，分析者在51唯SCLC患儿中都立用CeIISearch法律条文检验弧期CTCs技术水平，得出ED-SCLC,患儿的中都位CTCs计算为9.5个f 7.5ml噬，而LD-SCLC仅为1个／7.51111噬，有利于显然ED-SCLC患儿的CTCs技术水平很低LD-SCLC患儿。

（二）CTCs风险评估SCLC的及病状

CTCs是否可作为风险评估SCLC和病状的有救所指f,匙分析者们一直在探讨的原因。Houi等在2009年通过CellSearch法律条文检验了50唯SCLC患儿(LD-SCLC20唯，ED-SCLC30唯)的CTCs，发掘出CTCs>300个/7.5ml噬的患儿及CTCs

弧期CTCs>=50和

在该分析中都SCLC患儿的病状区分开绝对值来让8个/7.5ml噬，依此将患儿细分CTCs>=8及

Hiltermann等在2012年值得注意领域CellSearch法律条文检验59唯SCLC患儿在弧期、1天数肌肉针头后及4天数肌肉针头告一段落后外固噬CTCs技术水平，其中都ED-SCLC患儿38唯，LD-SCLC患儿2 1唯c弧期有43唯患儿(730-/o)CTCs≥2个/7.5ml噬，CTCs>215个/7.5ml噬和CTCs

经过1天数肌肉针头后患儿CTCs技术水平突出降低，且1天数肌肉针头后CTCs

分析者推断CTCs技术水平是SCLC病状的独立影响因子，其中都1天数肌肉针头后CTCs技术水平是SCLC和病状最弱的得出结论因子。

2013年ASCO发表的ECOG1508分析中都，分析者更进一步在155唯ED-SCLC中都加入类似物疗法律条文，并对其中都123唯患儿弧期CTCs进唯时检验，得出类似物疗法律条文未能该线ED-SCLC患儿的PFS和OS，但发掘出弧期CTCs≤l00和CTCs>100个／7.5ml噬的mPFS共五4.4和4.3个月末（P=0.07），OS共五10.7和7.2个月末(P=0.01)。分析者显然虽然类似物疗法律条文没有人能减低ED-SCLC患儿的PFS和OS，但却发掘出了CTCs确实是SCLC患儿的病状；也。

最仅有，Igawa等更进一步领域OBP-401试验开放性检验SCLC患儿外周噬CTCso领域OBP-401试验开放性检验乳白血病和癌症患儿CTCs的系统对开放性分析已有后期报道。分析纳入30唯韧治的SCLC患儿，29唯患儿(96%)外周噬CTCs阳开放性。在弧期，21唯患儿CTCs

（三）CTCs追踪SCLC的发作和分散

这两项的分析确实通过检验CTCs的显现出来追踪SCLC的发作和分散具有极其重要的诊疗本质o Tanaka等分析发掘出CTCs技术水平‘j 125唯膀胱癌患儿（还包括9唯SCLC患儿）的发展突出系统对开放性，特别是与高处分散保持良好（AUC-ROC 0,873 p

基于这些数据，著者显然CTCs可作为追踪膀胱癌高处分散的脊椎动物标记物。Natio等分析发掘出SCLC在弧期、疗法律条文告一段落后及发作后CTCs的阳开放性率共五68.6%、26.5%和67.6，预设SCLC发作后外周学CTCs技术水平消退，牵涉到高处分散消化道的个数为0、1和>=2的患儿其中都位CTCs计算共五2.0、7.5和21个/7.5ml噬,预设CTCs技术水平与高处分散消化道的个数有关，高处分散越多，CTCs计算就越（p

三、CTCs在SCLC诊疗领域中都的追寻方向

发作和分散是致使患儿疗法律条文失败和死亡的主要诱因，幸好的发作和分散并采敢务实合理的疗法律条文新政策可值得注意减低患儿生存率。然而，由于SCLC不足能够追踪发作和分散的脊椎动物；也，且常会规影像学检查和很难律条文发掘出纤分散灶及纤小存留病灶，致使牵涉到发作和分散的SCLC患儿很难及时接受病人和疗法律条文。

诊疗中都均LD-SCLC的患儿病状歧异较大，预设有些单单期的患儿在病人时确实已牵涉到了影像学很难发掘出的纤分散而被选为潜在的广泛应用期患儿。通过检验外周噬CTCs的显现出及个数牵涉到变化从而对SCLC患儿毒素状态进唯时高分辨率、动态地追踪和称赞，幸好的发作、分散，将有助诊疗眼科医生对疗法律条文时机的把握和疗法律条文策略的值得注意，但究竟CTCs的个数或牵涉到变化绝对值为多少时能够精确反映SCLC的发作或分散唯不清楚，必需越来越多的循证外科证据予以支持。

CTCs在风险评估SCLC患儿疗法律条文各个方面的领域唯处于追寻阶段，疗法律条文全过程中都CTCs个数的牵涉到变化与SCLC患儿肌肉针头的系统对开放性开放性及其与SCLC患儿MRI时机的值得注意等原因在将会需大量的外科分析。仅有5年，对CTCs是否可作为SCLC患儿病状所指标的分析逐渐增多，但SCLC最佳的病状CTCs区分开绝对值唯无定论，争议颇多。

其中都3项来自Hou、Naito、Hiltermann的分析将SCLC的病状CTCs用者定绝对值分别来让为50、8和2个／7.5ml噬，歧异很大，这确实与分析采唯的统计学方法律条文有相异以及入组样本量较少有关。仅有期威尼斯学者Normanno等论调将ED-SCLC和LD-SCLC患儿分开分析，对弧期、l天数肌肉针头后CTCs以及疗法律条文前后CTCs的牵涉到变化绝对值分别来让病状区分开绝对值，为将会的分析发放了新的想法。笔者所在的科研成就开发团队也自始致力于中都华民族SCLC患儿病状最佳CTCs区分开绝对值的分析，结果难以置信期待。

的个体肌肉针头法律条文是疗法律条文模式的蓬勃发展方向。SCLC患儿对肌肉针头类固醇的质子化普遍存在突出的相异，其主要诱因确实与简单的异质开放性、转录歧异及多态开放性有关。所以，逐步明晰SCLC的基因序列序列学特质对借助真自始本质上的SCLC个体肌肉针头法律条文尤为极其重要。仅有期中都华民族学者王洁等分析人员通过领域单蛋白质基因序列DNA手段对患儿单个CTC进唯时全基因序列序列、外显子基因序列序列DNA。

在此项分析中都，谢晓亮教授发明的多重异构化和环化反转的增量应用(MAIBAC)，顺利借助了对患儿外周噬单个CTC的全基因序列序列增量和深度DNA，在单个蛋白质技术水平探测全基因序列序列基因序列拷贝数反转(CNVs)和单核苷酸反转(SNVs)o单蛋白质技术水平CTCs基因序列序列DNA应用可及时发放如青霉素基因序列突变等个体肌肉针头法律条文所需的极其重要讯息，同时也为将会SCLC类似物类固醇的开发发放应用支持。

SCLC许多组织新种很难获取，允许了后续各项常会规分析的卓有成效，而利用CTCs构建的SCLC反转蛋白质移植瘤( CTC-derived explants，CDXs)模型，将会补救这一困难重重疑难。最仅有，Hodgkinson等更进一步将6唯ED-SCLC患儿lOml外周噬中都的CTCs提炼出后针头到免疫缺陷小鼠皮下，结果在4只小鼠口中呈现出了CDXs，显然SCLC患儿的CTCs具有致瘤开放性。

同时领域CelISearch法律条文检验这6唯SCLC患儿的CTCs，得出顺利呈现出CDXs的4唯患儿的CTCs计算原则上>400个／7.5ml噬，而另外2唯未呈现出CDXs的患儿其CTCs计算共五222和20个／7.5ml噬，预设SCLC的CTCs致瘤开放性与外周噬CTCs教量有关。有利于分析发掘出来得于肌肉针头敏感开放性SCLC，肌肉针头青霉素开放性SCLC患儿的CDXs倍增整整短、繁殖越来越迅速。对3唯CDXs拒绝接受顺铂和融为一体泊苷肌肉针头类固醇，其敏感开放性顺序为CDX3>CDX2>CDX4，相应患儿的OS共五9.7.3.5.0.9个月末，预设对CDXs进唯时毒素药敏试验开放性可以间接质子化患儿生存整整。

该分析显示均SCLC的外周噬CTCs具有干蛋白质特开放性，可进唯时毒素培养、呈现出与原发高度类似于的CDXs，为SCLC患儿的毒素药敏试验开放性、青霉素机制分析等一系列常会规分析发放了极少量的许多组织，补救了SCLC患儿新种比如说不足的原因。

结论

从现唯的分析可以窥见，虽然CTCs在SCLC中都的诊疗领域仍处于追寻阶段，但大环境宽广。迄今，诸多转化开放性分析自始在进唯时中都，相信随着分析的不断深入，CTCs将会被选为SCLC的前沿阵地，期待CTCs在SCLC的领域中都为我们造就难以置信兴奋。

撰稿人： 白雪